均質(zhì)是獲得菌群的方法之一,均質(zhì)也稱勻漿,是使懸浮液(或乳化液)體系中的分散物微粒化、均勻化的處理過程,這種處理同時(shí)起降低分散物尺度和提高分散物分布均勻性的作用。
均質(zhì)中常用拍打式均質(zhì)機(jī)又稱無菌均質(zhì)器,可以從固體樣品中直接提取細(xì)菌。使用無菌均質(zhì)袋,拍擊的機(jī)械裝置作用在均質(zhì)袋上,不和樣品直接接觸,因此不會(huì)受污染。
拍打式均質(zhì)機(jī)由于使用方便,不易受污染,使用越來越廣泛。但其缺點(diǎn)是均質(zhì)的力量不足,對(duì)于堅(jiān)硬的樣品不但無法均質(zhì)均勻,還會(huì)引起均質(zhì)袋的破損。
操作步驟
1、將樣品放入無菌均質(zhì)袋中(一般為25g)。
2、倒入225ml滅菌生理鹽水或緩沖蛋白胨水,或根據(jù)檢測要求,倒入標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的液體培養(yǎng)基。
3、將裝有樣品的均質(zhì)袋放入均質(zhì)機(jī)中,均質(zhì)袋的開口在關(guān)閉均質(zhì)機(jī)時(shí)夾住。
4、設(shè)置參數(shù)(拍擊速度、拍擊時(shí)間等)。
5、扳下扳手,進(jìn)行樣品均質(zhì)。
6、均質(zhì)結(jié)束后,往上抬起扳手打開均質(zhì)機(jī)門,取出樣品均質(zhì)袋。
注意事項(xiàng)
1、使用前先將電源插頭固定牢靠后,再打開機(jī)器開關(guān)。插頭不能使其出現(xiàn)松動(dòng),因?yàn)闄C(jī)器工作時(shí)會(huì)產(chǎn)生振動(dòng)導(dǎo)致插頭脫落。這種突然短點(diǎn)對(duì)機(jī)器會(huì)造成損傷。
2、拍打式均質(zhì)機(jī)工作時(shí)不準(zhǔn)隨便打開均質(zhì)機(jī)門,防止樣液飛濺(有的均質(zhì)機(jī)打開門以后自動(dòng)停止拍擊均質(zhì)),一定要先關(guān)機(jī)器再開門,然后同樣關(guān)閉門之后再開機(jī)。
3、使用均質(zhì)機(jī)之前,一定要檢查均質(zhì)機(jī)內(nèi)是否有異物,防止損傷機(jī)械裝置或均質(zhì)袋。
4、堅(jiān)硬樣品,盡量不要用拍打式均質(zhì)機(jī),防止均質(zhì)袋破裂,冷凍樣品需緩化解凍以后才能使用拍擊式均質(zhì)機(jī)。當(dāng)一定要拍打堅(jiān)硬樣品時(shí),一定要加套均質(zhì)袋。
5、均質(zhì)機(jī)的底部是空的,如遇均質(zhì)袋意外破裂時(shí),方便清理溢出物。
6、均質(zhì)機(jī)和均質(zhì)袋放置在陰涼干燥處,特別是均質(zhì)袋應(yīng)避酸堿、避陽光,防止其過早的變脆老化。
7、拍打式均質(zhì)機(jī)用完之后,先關(guān)機(jī)斷電,然后將其內(nèi)外清理干凈。
8、對(duì)于一些拍打均質(zhì)后,容易堵塞移液管或移液器槍頭的樣品,建議使用帶過濾網(wǎng)的無菌均質(zhì)袋。